ELISA vs. western blot

ELISA	항원 항체의 특이적 결합력 이용	western blot
Capture Ab coating → Blocking → Sample → Detector Ab → Substrate → Stop solution → Analysis		SDS-PAGE → Transfer → Staining/Destainig → Blocking → Ab probing/washing → Detection → Analysis
분비되는 단백질 sup 따서 실험		세포 내에서 발현되는 단백질 cell 깨서 농축해서 실험
OD 값으로 비교 단시간 여러 시료 확인할 때 사용		여러가지 혼합 단백질 중 원하는 단백질 한가지의 유무 확인 가능 SDS-PAGE 를 통해 사이즈별로 구분 ==> 내 단백질의 사이즈 알 수 있음  ==> ELISA에서 얻은 signal의 non-specificity 여부와 real signal임을 검증 가능
standard 잡기 때문에 절대정량 가능		절대 정량 사실상 불가, 상대 비교
native protein 상태에서 확인		linear protein 상태에서 확인
Ponceau S		HRP/ECL
해당 단백질의 enzymatic activity도 정량 분석 가능		해당 단백질의 phosphorylation이나 cleavage form의 증감 확인하여 단백질의 activity 변화 확인 가능

https://www.ibric.org/myboard/read.php?id=310272&Board=exp_qna 

ELISA assay와 western blotting의 차이?

https://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=101429&ksr=1&FindText=elisa@%20western 

ELISA와 western blotting의 차이